中国菌物学会发布
T/MSC003-2024
目次
前言I
1范围1
2规范性引用文件1
3术语和定义1
4技术要求2
5培养基配制2
6菌种生产3
7菌种质量4
8入库留样4
9标志、包装、运输、贮藏等4
附录A(资料性)6
T/MSC003-2024
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》
的规定起草。
本标准由中国菌物学会归口。
本标准起草单位:中国医学科学院药用植物研究所。
本标准主要起草人:郭顺星,曾旭,刁海欣。
T/MSC003-2024
乌天麻栽培蜜环菌菌种生产技术规程
1范围
本文件适用于乌天麻(GastrodiaelataBl.f.glaucaS.Chow)栽培用蜜环菌菌种的生产
及使用,包括蜜环菌属的一些种类(Armillariaspp.)。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期
的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括
所有的修改单)适用于本文件。
GB/T1.1—2020标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则
NY/T528—2010食用菌菌种生产技术规程
NY/T1935—2010食用菌栽培基质质量安全要求
DB51/T1640天麻生产技术规程
3术语和定义
3.1
乌天麻GastrodiaelataBl.f.glaucaS.Chow
乌天麻,为天麻的变型,茎灰棕色,带白色纵条纹,花蓝绿色;其块茎折干率高,是优
良品种;在海拔1200-2000m的山区栽培生产的乌天麻,品质佳,口感好。
3.2
蜜环菌
为乌天麻块茎生长提供基础营养的共生真菌,为伞菌目小皮伞科蜜环菌属的部分真菌菌
株,如高卢蜜环菌ArmillariagallicaMarxm.Romagn.。
3.3
菌种culture
繁殖或栽培使用的蜜环菌菌丝培养物,生长于适宜基质上。
来源:GB/T12728,2.5.6
3.3.1

母种stockculture
经各种方法选育出来的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物。也称一级种、试
管种。
来源:GB/T12728,2.5.7
3.3.2
原种motherspawn
由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。也称二级种。
来源:GB/T12728,2.5.8
3.3.3
栽培种spawn
由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。也称三级种。
来源:GB/T12728,2.5.9
T/MSC003-2024
3.4
培养基Medium
具有适宜的理化性质,用于微生物生长的基质。
来源:GB/T12728,2.1.22
4技术要求
4.1技术人员
技术人员应有与菌种生产相适应的操作人员、检验人员等。
4.2场地选择
应选择地势较高,通风良好,排水畅通,交通便利的场地。
4.3厂房设置和布局
4.3.1厂房布置应按菌种生产工艺流程合理安排布局。可包括独立的摊晒场、原材料库、配
料分装室(场)、灭菌室、冷却室、接种室、培养室、贮存室、菌种检验室等。厂房建造结
构和功能应满足菌种生产的基本需要。
4.3.2摊晒场应地面平整开阔,光照充足。
4.3.3原材料库应恒温干燥,防雨防潮、防虫,防鼠、防杂菌污染、配备防火设施。
4.3.4配料分装室(场)应水电方便,空间充足。如安排在室外,应有天棚,防雨防晒。
4.3.5灭菌室应配置水电,通风良好,进出物料方便,热源配套,配置安全监测设置。
4.3.6冷却室应洁净、防尘、易散热。
4.3.7接种室应设置缓冲间,防尘换气性能良好,内壁和屋顶光滑,经常清洗和消毒。
4.3.8培养室和贮存室应内壁和屋顶光滑,便于清洗和消毒;墙壁厚度适当,利于控温、控
湿,便于通风;有防虫防鼠措施。
4.3.9菌种检验室:水电方便,便于安装相应的检验仪器和设备。
4.4设施及设备
设施及设备包括搅拌机、装瓶(袋)机、高压灭菌锅或常压灭菌锅、超净工作台或接种
箱、磅秤、天平、调温设备、除湿机、培养架、恒温箱、冰箱、显微镜等及常规用具。高压
灭菌锅应每年通过经有关部门安全检验。
4.4卫生要求
4.4.1厂房设置应保持清洁卫生,周围300m内应无禽畜舍,无垃圾、粪便场,无污水和扬
尘的水泥厂、砖瓦厂、石灰厂、木材加工厂等其他污染源。
4.4.2生产使用容器、原料等,卫生应符合NY/T528的规定。
4.5生产工艺
蜜环菌菌种生产工艺流程宜为培养基配制→分装→灭菌→冷却→接种→培养(检查)→
成品。
5培养基配制

培养基应符合NY/T1935规定,不应选择变质、污染的原料,不应添加农药、肥料等。
天然材料,选择如壳斗科树叶、果树或阔叶树木签或木屑、麦麸、玉米芯等,要求新鲜、
无虫、无霉、洁净、干燥;营养补充剂,选择如葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾等,需化学纯
及以上级别。
菌种推荐配方,见表1:
II
T/MSC003-2024
表1菌种基质配方
菌种名称菌种级别基质配方
(1)去皮有机马铃薯200g,麦麸20g,葡萄糖20g,琼脂8g,
母种
过滤加去离子水定容至1000mL。
(1)土豆100g,麦麸30g,木屑30g,松针20g,黄豆粉20g,玉米
粉20g,葡萄糖10g,硫酸镁1g,磷酸二氢钾2g,琼脂18g,加去离子水
蜜环菌原种
定容至1000mL。
(2)麦麸20%,木屑75%,玉米碴5%,含水量75%.
(1)木棒,用含硫酸镁0.1%,磷酸二氢钾0.2%的水浸泡24小时即
栽培种
可。
6菌种生产
6.1菌种质量
6.1.1应选择适宜乌天麻栽培用的菌株,从具有相应资质的单位引种,且种性应清楚。
6.1.2种源生产菌种不应使用来历不明、种性不清的菌种和生产性状未经系统试验验证的组
织分离物。
6.1.3蜜环菌母种每年在种源进入扩大生产程序之前,应进行菌种质量和种性检验,包括纯
度、活力、菌丝长势的一致性、菌丝生长速度、菌落外观等,验证种性。
6.2菌种制作
应按照NY/T528执行。
6.2.1母种生产
蜜环菌母种宜每年8月至9月生产,宜为原种生产前1.5个月至2个月。按步骤执行:
a)基质配制按表1配方确定,可适度增减。
b)分装:培养基装入玻璃试管内。每只试管的分装量宜为试管长度的1/2至2/3,塞上
棉塞或硅胶塞。
c)灭菌:高压灭菌锅灭菌压力0.12MPa~0.15MPa,灭菌温度121℃~122℃,灭菌
时间30min,灭菌结束后蜜环菌母种应直立放置,冷却备用。
d)接种:在超净工作台上或接种箱内,用无菌操作法,用接菌铲挑取直径0.5cm的纯
菌种,转接于试管斜面培养基上。并贴标签。标签内容应包括编号、来源、接种时间等。
e)培养、检查:蜜环菌接种后,将接种好的试管放置在18℃~20℃的恒温培养箱中,
待蜜环菌菌丝长满培养基(18d~30d)。培养过程中应及时剔出菌丝长速慢,稀疏、不匀、
发黑、污染者。
f)母种转管次数不应大于5次。
6.2.2原种生产
蜜环菌原种宜每年10月至11月生产,宜在原种生产前1.5个月至2个月。按步骤执
行:
a)基质配制按表1配方确定,可适度增减。

b)分装:培养基装入500mL菌种瓶,装至瓶肩处,中间打一通气孔,盖塞。
c)灭菌:高压灭菌锅灭菌压力0.12MPa~0.15MPa,灭菌温度121℃~125℃,灭菌
时间90min,冷却后备用。
d)接种:在超净工作台上或接种箱内,用无菌操作法,挑取直径1.5cm~3.0cm左右
的优质母种块(连同培养基),移植接种于原种培养基上端中央,随即盖塞或扎口。并对同
一批次的贴上标签。标签内容应包括编号、来源、接种时间等。
III
T/MSC003-2024
e)培养、检查:蜜环菌接种后,将接种好的菌种袋放置在18℃~20℃的恒温培养室中
培养30d~60d,蜜环菌菌丝即可长满整个培养基。培养过程中应及时剔出菌丝长速慢,稀
疏、不匀、发黑、污染者。
6.2.3栽培种生产
蜜环菌栽培种宜每年的12月至次年1月生产,宜为天麻栽培前的2个月~3个月。按
步骤执行:
a)基质配制按表1配方确定,可适度增减。
b)分装:培养基装入菌种瓶或菌种袋,填装至瓶肩处或距离袋口为5cm左右,盖塞。
c)灭菌:高压灭菌锅灭菌压力0.12MPa~0.15MPa,灭菌温度121℃~125℃,灭菌
时间210min,冷却后备用。
d)接种:在无菌室内,用无菌操作法,挑取直径3.0cm~4.0cm左右的优质原种块(连
同培养基),移植接种于原种培养基上端中央,随即盖塞或扎口。并对同一批次的贴上标签,
标签内容应包括编号、来源、接种时间等。
e)培养、检查:蜜环菌接种后,将接种好的菌种袋放置在18℃~20℃的恒温培养室中
培养60d~75d,蜜环菌菌丝长满整个培养基,培养过程中应及时剔出菌丝长速慢,稀疏、
不匀、发黑、污染者。
7菌种质量
蜜环菌母种、原种及栽培种,应菌丝健壮,新鲜,无污染,无霉变,如附录所示。
8入库留样
8.1入库
完成培养的菌种应及时登记入库。菌种生产各环节应记录时间、菌株、操作人员等。
8.2留样
菌种应留样备查,留样的数量宜为每个批号菌种不少于10支(瓶、袋),置于4°C冷
藏,贮存至使用者在正常条件下培育出蜜环菌。
9标志、包装、运输、贮藏等
9.1标志
9.1.1标签
标签应符合表2的规定。
表2乌天麻栽培用蜜环菌菌种质量要求
菌种名称菌株名称
菌种类别传代次数
生产单位(盖章)采购单位(盖章)
菌种数量接种日期
检验结果合格菌种:支/瓶
检验意见
证书签发期证书有效期
检验




